Kaikki iLive-sisältö tarkistetaan lääketieteellisesti tai se tarkistetaan tosiasiallisen tarkkuuden varmistamiseksi.
Meillä on tiukat hankintaohjeet ja vain linkki hyvämaineisiin mediasivustoihin, akateemisiin tutkimuslaitoksiin ja mahdollisuuksien mukaan lääketieteellisesti vertaisarvioituihin tutkimuksiin. Huomaa, että suluissa ([1], [2] jne.) Olevat numerot ovat napsautettavia linkkejä näihin tutkimuksiin.
Jos sinusta tuntuu, että jokin sisältö on virheellinen, vanhentunut tai muuten kyseenalainen, valitse se ja paina Ctrl + Enter.
Southern blotting
Lääketieteen asiantuntija
Viimeksi tarkistettu: 05.07.2025
Southern-blottaus (jonka kehittivät E. Southern ja R. Davis vuonna 1975) on tällä hetkellä tärkein menetelmä tietyn sairauden geenien tunnistamiseen. Tätä varten potilaan soluista uutetaan DNA:ta ja käsitellään yhdellä tai useammalla restriktioendonukleaasilla. Tuloksena olevat fragmentit altistetaan elektroforeesille, jonka avulla ne voidaan erottaa koon mukaan (pienemmät fragmentit liikkuvat geelin huokosten läpi nopeammin). Fragmentit siirretään (uudelleentulostetaan) sitten nitroselluloosasuodattimelle, jolle kerrostetaan radioaktiivisesti merkitty koetin. Koetin sitoutuu vain komplementaariseen sekvenssiin. Sitten autoradiografian avulla määritetään halutun genomisen DNA:n fragmentin sijainti elektroferogrammissa.
Kiinteälle matriisille tipoittain ilman alustavaa rajoitusta ja elektroforeesia kiinteälle matriisille pisaroittain levitettyjen leimattujen DNA-koettimien hybridisaatiota kutsutaan piste- tai rakohybridisaatioksi riippuen suodattimen DNA-täplän konfiguraatiosta (pyöreä tai pitkulainen).
[