Ihmisen papilloomaviruksen testit: miten ottaa, dekoodausmenetelmä

Ihmisen papilloomavirus on vakava uhka. Diagnostiikka on välttämätöntä infektiokannan ja sen onkogeenisyyden riskin määrittämiseksi. Tällaiset tiedot mahdollistavat sopivimman ja tehokkaimman hoitosuunnitelman laatimisen.

Useat asiantuntijat suorittavat samanaikaisesti korkealaatuista diagnostiikkaa. Kehon tutkimuksen tärkeimmät indikaatiot ovat:

• Aktiivinen seksielämä ja usein vaihtuvat seksuaalikumppaneet.
• Kutina, polttelu sukupuolielinten alueella, epätyypillinen vuoto.
• Uusien kasvainten esiintyminen iholla ja limakalvoilla papilloomien, syylien ja kondyloomien muodossa.

Papilloomaviruksen diagnoosi koostuu laboratorio- ja instrumentaalisten menetelmien kompleksista:

• Silmämääräinen tutkimus ja anamneesin kerääminen – lääkäri tutkii sairastuneet alueet ja kysyy, milloin ihottuma tai muut HPV:n oireet ilmestyivät ensimmäisen kerran. Arvioi kasvainten tyypin ja muodon. Jos potilaalla on peräaukon ja sukuelinten kasvaimia, suoritetaan kohdunkaulan tutkimus ja virtsaputken tähystys.
• Irtosolu- ja kaavinnäytteiden sytologia – tehdään HPV:hen liittyvien solutason morfologisten muutosten selvittämiseksi. Menetelmän tarkkuus riippuu näytteenottotekniikasta ja laboratorioteknikkojen pätevyydestä.
• Kolposkopia on limakalvon tutkimus subkliinisten infektiomuotojen havaitsemiseksi. Diagnoosi vahvistetaan seuraavien tekijöiden läsnäololla: leukoplakia, mosaiikki, punktuuri, epänormaalien muutosten vyöhyke.
• Koepala on pienen määrän sairastuneen kudoksen poistaminen mikroskooppista tutkimusta varten. Se tehdään yleensä silloin, kun epäillään kohdunkaulan sairastumista.
• Histologinen tutkimus – biopsiasta saatu materiaali lähetetään laboratoriotutkimukseen syöpää edeltävien tilojen ja muiden solupoikkeavuuksien havaitsemiseksi.
• PCR – suoritetaan yksittäisten HPV-tyyppien tunnistamiseksi. Diagnostiikkaan käytetään verta, virtsaa, limaa ja muita kudosnesteitä.
• Digene-testi on yksi luotettavimmista diagnostisista menetelmistä. Sillä on korkea herkkyys ihmisen papilloomavirukselle. Sen avulla voidaan määrittää genotyyppi ja sen kuuluminen korkea- tai matala-onkogeeniseen ryhmään.

Nykyään on olemassa monia menetelmiä, joiden avulla voit havaita HPV-infektion ja määrittää sen aggressiivisuuden asteen.

Ihmisen papilloomaviruksen seulonta

Pakollinen testi potilaille, joilla on taipumus pahanlaatuisiin prosesseihin kehossa, on seulonta. Myös ihmisen papilloomavirus on syy tähän laboratoriotestiin.

Ensimmäistä seulontaa suositellaan 30-vuotiaille naisille. Analyysi on välttämätön paitsi papilloomaviruksen havaitsemiseksi myös HPV:hen liittyvien kohdunkaulan eroosiovaurioiden ehkäisemiseksi.

Useimmiten potilaille määrätään seuraavanlaisia seulontoja:

• Sytologinen PAP-testi – tutkimuksessa käytetään nestemäiseen liuokseen asetettua kohdunkaulan kaavintanäytettä. Se auttaa tunnistamaan onkologisia HPV-kantoja varhaisessa kehitysvaiheessa.
• Laajennettu – tunnistaa korkean onkogeenisuuden omaavat genotyypit ja niiden pitoisuudet kehossa.
• Polymeraasiketjureaktiolla on korkea diagnostinen arvo, koska se mahdollistaa kaikenlaisten ihmisen papilloomaviruksen tunnistamisen.

HPV-seulonta tehdään sekä taudin diagnosoinnin että hoidon aikana ja hoidon tulosten arvioimiseksi.

Ihmisen papilloomaviruksen testi

Jos epäillään papilloomavirusta, kaikille potilaille määrätään joukko diagnostisia toimenpiteitä. HPV-analyysi on viruksen tyypin määrittäminen laboratorioympäristössä. Tutkimukseen käytetään erilaisia biologisia nesteitä ja kudoksia.

Useimmiten analyysia varten otetaan näyte sukupuolielimistä. Materiaalin ottaminen tältä alueelta on välttämätöntä, vaikka papillomatoosiin ei olisikaan näköoireita. Tuloksena olevasta koepalasta tutkitaan mikroskoopilla viruksen muuttamien epiteelisolujen varalta. Diagnostisten tulosten perusteella määritetään infektion tyyppi ja sen onkogeenisyyden riski.

Raskautta suunniteltaessa on pakollista tehdä papillomatoosi-infektion testi hedelmättömyyden syiden ja raskauden patologioiden selvittämiseksi. Tässä tapauksessa testi määrätään molemmille kumppaneille kerralla. Tämä johtuu siitä, että virus tarttuu läheisessä kontaktissa. Tutkimuksen tulosten perusteella lääkäri voi määrätä lisädiagnostisia menetelmiä ja laatia hoitosuunnitelman.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]

Ihmisen papilloomaviruksen kvantitatiivinen analyysi

Papilloomaviruksen havaitsemiseksi, sen tyypin ja aktiivisuuden asteen määrittämiseksi suoritetaan kvantitatiivinen analyysi. HPV:n määrittämiseksi on useita menetelmiä, tarkastellaan niitä:

1. Polymeraasiketjureaktio (PCR) on HPV-diagnostiikan standardi. Analyysi perustuu viruksen DNA:n kopioiden määrän lisäämiseen biopsiassa. Tämä menetelmä mahdollistaa jopa yksittäisten virustyyppien havaitsemisen suurella tarkkuudella.
2. Digene-testi – tämän menetelmän erikoisuus on lisääntyneen onkogeenisuuden omaavien genotyyppien luotettava havaitseminen. Analyysissä käytetään erilaisia biologisia nesteitä ja materiaaleja.
3. Viruksen vasta-aineiden läsnäolon määritys - analyysi paljastaa immuunijärjestelmän spesifisiä proteiineja. Jokainen elimistöön tuleva virusaiheuttaja edistää ainutlaatuisten immunoglobuliinien tuotantoa. Jos veren seerumista havaitaan ihmisen papilloomaviruksen vasta-aineita, se viittaa elimistön infektioon.

Kvantitatiivisen analyysin suorittamiseen käytetään kapillaariverta (sormesta), iho- ja limakalvonäytteitä sekä kudosbiopsioita. 12 tuntia ennen testien tekemistä on lopetettava sieni-, virus- ja mikrobilääkkeiden sekä muiden lääkkeiden, myös ehkäisyvälineiden, käyttö. Diagnoosipäivänä on käytävä suihkussa ja pestävä intiimialueet huolellisesti, jos niistä otetaan näytteitä. Myös 2–3 päivää ennen toimenpidettä on pidättäydyttävä yhdynnästä.

Hoitava lääkäri tulkitsee saadut tulokset. Lääkäri ottaa huomioon paitsi suoritettujen diagnostisten tietojen myös taudin kliiniset ilmentymät. Muuten tuloksia voidaan tulkita väärin.

Ihmisen papilloomaviruksen DNA, PCR

Yksi yleisimmistä ja luotettavimmista menetelmistä ihmisen papilloomaviruksen DNA:n havaitsemiseksi on PCR. Polymeraasiketjureaktion suorittamiseen käytetään erilaisia biologisia materiaaleja: verta, virtsaa, limakalvonäytteitä, lapsivettä. Analyysin avulla voit todeta infektion läsnäolon, vaikka se olisi piilevässä muodossa kehossa.

Tämän diagnostisen menetelmän periaate perustuu ihmisen ja viruksen DNA:n eristämiseen. Mikä tahansa deoksiribonukleiinihappo koostuu neljästä nukleotidista:

• A – adeniini.
• T – tymidiini.
• G – guaniini.
• C – sytosiini.

Genetiikan sääntöjen mukaan niillä on tietty yhdistelmäjärjestys: A+T, G+C. Kaikilla elävillä organismeilla on oma DNA:nsa, joka voidaan eristää. PCR tunnistaa patogeenisen DNA:n fragmentit ja eristää siten patogeenin.

PCR:n edut:

1. Yleismaailmallisuus – ihmisen papilloomaviruksen lisäksi tutkimuksessa voidaan havaita monia muita tartuntatautien taudinaiheuttajia.
2. Korkea herkkyys – viruksen läsnäolon määrittämisen lisäksi menetelmä määrittää sen tyypin ja muut ominaisuudet.
3. Tehokkuus – tunnistaa luotettavasti tarvittavan tartunnan.
4. Nopeus – testitulokset voidaan saada 24 tunnin kuluessa testin tekemisestä.

Analyysin valmistelu:

• Sinun tulisi lopettaa ehkäisypillereiden käyttö viikkoa ennen suunniteltua testiä, koska ne voivat vaikuttaa tuloksiin.
• Tutkimusta ei suoriteta kuukautisten aikana eikä 3 päivää sen jälkeen.
• Sinun tulisi välttää yhdyntää kaksi päivää ennen testiä.
• Diagnostiikka tehdään tyhjään vatsaan, viimeisen aterian tulisi olla 12 tuntia ennen analyysiä. Mutta voit juoda vettä.
• HPV PCR -testin ottopäivänä ei ole suositeltavaa suorittaa hygieniatoimenpiteitä tai käydä vessassa kaksi tuntia ennen näytteenottoa.

Lääkärin tulee tulkita saadut tulokset. Alle 3 Lg:n indikaattori on taudinaiheuttajan merkityksetön pitoisuus, 3–5 Lg on kliinisesti merkittävä pitoisuus ja yli 5 Lg on korkea. Normaalisti kaikkien kvantitatiivisten tiitterien tulisi olla negatiivisia. Negatiiviset tulokset eivät kuitenkaan aina osoita taudin puuttumista. Tämä havaitaan usein, kun viruspitoisuus elimistössä on merkityksetön ja kun immuunijärjestelmä tukahduttaa sen.

Kaikista eduista huolimatta PCR:llä on useita haittoja. Analyysi tulisi tehdä vain nykyaikaisessa laboratoriossa väärien tulosten välttämiseksi. Erityistä huomiota on kiinnitettävä materiaalin keräämiseen. Vain lääkärin tulisi tulkita tulokset, koska positiivisia tuloksia voi esiintyä myös äskettäisen infektion hoidon jälkeen.

Ihmisen papilloomaviruksen kaavinta

Miesten sukupuolielinten HPV-infektion havaitsemiseksi tehdään kaavinta eli Digene-testi. Näyte kerätään virtsaputkesta erityisellä harjalla; joissakin tapauksissa kudosta otetaan peniksen päästä. Ennen testiä on käytävä suihkussa ja pestävä itsensä huolellisesti. Henkilökohtaisen hygienian laiminlyönti vaikuttaa negatiivisesti testin tuloksiin.

Naisilla otetaan kohdunkaulan kaavintanäyte, jos epäillään dysplasiaa, eroosiota tai muita HPV:n aiheuttamia patologisia prosesseja. Materiaalin keräämiseksi lääkäri poistaa valkovuodon ja työntää pienen harjan elimeen pyörittäen sitä akselinsa ympäri kohdunkaulan kanavassa. Kaikkien käsittelyjen jälkeen harja asetetaan koeputkeen väliaineen kanssa ja lähetetään laboratorioon.

Saadut materiaalit lähetetään erotusdiagnostiikkaan PCR-menetelmällä; sytologista seulontaa ei suoriteta. Tulokset ovat valmiita 2-3 päivää analyysin jälkeen. Saadut tiedot antavat täydelliset tiedot viruksen tyypistä, sen karsinogeenisuudesta ja useista muista taudin kulkuun vaikuttavista tekijöistä. Jos tulokset ovat virheellisiä, tutkimus suoritetaan uudelleen. Toistuva seulonta on tarpeen hoidon aikana ja sen jälkeen hoidon tehokkuuden määrittämiseksi.

Ihmisen papilloomaviruksen sively

Jos gynekologisessa tutkimuksessa löydetään syyliä tai kondyloomia sukupuolielinten alueelta, lääkäri ottaa HPV-näytteen. Lääkäri harjaa sairastuneen kudoksen erityisellä harjalla. Näyte otetaan naisilta kohdunkaulan kanavasta ja miehiltä virtsaputkesta. Kerätty koepala lähetetään laboratorioon tutkittavaksi.

Seuraavanlaisia kokeita käytetään, kun epäillään ihmisen papilloomavirusta:

• PCR – tunnistaa infektion DNA:n. Analyysiä varten otetaan kaavinnäyte miehiltä virtsaputkesta ja naisilta emättimestä ja kohdunkaulan kanavasta. Myös siemennestettä tai virtsaa voidaan käyttää.
• Digeenitestaus on kerätyn materiaalin tutkimus molekyylitasolla. Testaus on kahden papilloomainfektioiden ryhmän erottaminen samanaikaisesti - korkean ja matalan onkogeenisuuden omaavien.

Yllä olevat tutkimukset luokittelevat tulokset viiteen tyyppiin:

1. Epätyypillisten solujen puuttuminen.
2. Muutettujen solujen läsnäolo tulehdusprosessin vuoksi.
3. Minimimäärä soluja, joilla on epätyypillinen rakenne.
4. Pahanlaatuiset solut.
5. Suuri määrä onkogeenisiä soluja.

Myös Bethesdan järjestelmän mukainen luokittelu koostuu indikaattoreista, jotka osoittavat alhaisen ja korkean muutosasteen. Tässä tapauksessa tahranpoiston dekoodaus esitetään seuraavilla tiedoilla:

• NILM – normaali epiteeli.
• ASCUS – solujen muutokset dysplasian, tulehduksen, sukupuoliteitse tarttuvan infektion tai HPV:n vuoksi.
• ASC-H – levyepiteelin rakenteessa havaittiin poikkeavuuksia. Tämä tulos viittaa onkologian tai vaikean dysplasian varhaisvaiheeseen.
• LSIL – pieni määrä muuttuneita soluja näytteessä. Viittaa dysplasiaan tai papilloomavirukseen.
• HSIL – merkittäviä muutoksia epiteelissä. Vaikea dysplasia ja voimakas onkologia. Jos tätä tulosta ei oteta huomioon, 7 %:lla potilaista kehittyy pahanlaatuinen syöpä 3–5 vuoden kuluessa.
• AGC on epätyypillinen rauhasepiteeli. Sitä esiintyy kohdun syövässä tai dysplasiassa.
• AIS – onkologian varhaisvaiheet.
• Korkea-asteinen SIL – levyepiteelikarsinooma.

Koetulosten saamisen nopeus riippuu valitusta tutkimusmenetelmästä. Yleensä dekoodaus on valmis 2-3 päivässä.

[ 12 ], [ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ]

Vasta-aineet ihmisen papilloomavirusta vastaan

HPV-vasta-aineiden havaitsemiseksi on osoitettu veren entsyymi-immunomääritys. Tämän tutkimuksen periaatteena on määrittää immunoglobuliinien läsnäolo tartuntatauteja aiheuttavassa aineessa. ELISA-menetelmällä tehtävä diagnostiikka osoittaa kehon immuunivasteen virukselle. Havaituista vasta-aineista riippuen taudin seuraavat vaiheet erotetaan:

• IgM – akuutti.
• IgG – krooninen tai toipumisvaihe.
• IgA – kroonisen infektion uusiutuminen.

Vasta-ainetestin tulokset ovat valmiita 1–3 päivän kuluttua sen ottamisesta. Tulosten tulkinnassa on otettava huomioon, että ihmisen papilloomavirus voi olla epäsuora jälki, joten PCR- ja muita testejä tehdään infektion olemassaolon selvittämiseksi. Lisäksi ELISA ei vahvista viruksen genotyyppiä tai karsinogeenisuusriskiä.

[ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]