Verihiutaleiden aggregaatio ristosetiinillä (von Willebrandin tekijä )

Von Willebrand -tekijän aktiivisuuden viitearvot (normaali) ovat 58–166 %.

Von Willebrand -tekijää syntetisoivat endoteelisolut ja megakaryosyytit. Se on välttämätön verihiutaleiden normaalille kiinnittymiselle ja sillä on kyky pidentää tekijä VIII:n puoliintumisaikaa. Plasman hyytymistekijä VIII – antihemofiilinen globuliini A – kiertää veressä kolmen alayksikön kompleksina, jotka on nimetty VIII-k:ksi (hyytymisyksikkö), VIII-Ag:ksi (pääantigeenimarkkeri) ja VIII-vWF:ksi (VIII-Ag:hen liittyvä von Willebrand -tekijä). Von Willebrand -tekijän uskotaan säätelevän antihemofiilisen globuliini A:n (VIII-k) hyytymisosan synteesiä ja osallistuvan verisuonten ja verihiutaleiden hemostaasiin.

Von Willebrandin tauti on perinnöllinen sairaus, jolle on ominaista pidentynyt verenvuotoaika, vähentynyt ristosetiinikofaktoriaktiivisuus ja vaihtelevassa määrin vähentynyt tekijä VIII:n koagulanttiaktiivisuus. Taudin kliiniset oireet ovat samanlaisia kuin trombosytopatian. Potilailla, joilla on merkittävästi vähentynyt tekijä VIII:n aktiivisuus, voi kuitenkin esiintyä hematoomia ja hemartroosia.

Laboratoriotutkimusten perusteella, joiden avulla voimme määrittää von Willebrand -tekijän rakenteen ja aktiivisuuden, erotetaan seuraavat taudin muodot.

• Tyypin I (70 % kaikista tapauksista) tautia leimaa ristosetiinikofaktorin (von Willebrand -tekijä) ja koagulanttiaktiivisuuden (VIII-k) lievä lasku von Willebrand -tekijän normaalin makromolekyylirakenteen kanssa.
• Tyyppi II: perustuu von Willebrand -tekijän suurimolekyylisten polymeerien selektiiviseen puutteeseen, joka johtuu tämän proteiinin rakenteen häiriöistä.
  • Tyypin IIB trombosytopenian aiheuttaa von Willebrand -tekijän ja verihiutaleiden välisen lisääntyneen vuorovaikutuksen lisääntyminen, ja verihiutaleiden aggregaattien lisääntynyt puhdistuma johtaa trombosytopeniaan.
• Tyypin III diabetekselle on ominaista von Willebrand -tekijän vaikea kvantitatiivinen puutos, joka johtaa kliinisesti merkittävään tekijä VIII:n aktiivisuuden (VIII-k) vähenemiseen.

Von Willebrand -tekijän pitoisuus määritetään tapauksissa, joissa vuotoaika on pidentynyt, verihiutaleiden määrä on viitearvojen rajoissa eikä verihiutaleiden toimintahäiriölle ole ilmeisiä syitä. Von Willebrand -tekijän arvioimiseksi määritetään von Willebrand -tekijän määrällinen pitoisuus (ristosetiini-kofaktoriaktiivisuuden tutkimus), tutkitaan ristosetiinin indusoimaa verihiutaleiden agglutinaatiota ja tekijä VIII:aan liittyvän von Willebrand -tekijän antigeenistä rakennetta (VIII-vWF).

Verihiutaleiden aggregaation määrittäminen ristosetiinilla plasmassa käytetään von Willebrand -tekijän kvantitatiiviseen arviointiin. Ristosetiiniaggregaation asteen ja von Willebrand -tekijän määrän välille on osoitettu lineaarinen suhde. Menetelmä perustuu tämän antibiootin (ristosetiinin) kykyyn stimuloida von Willebrand -tekijän ja verihiutaleiden glykoproteiini Ib:n vuorovaikutusta in vitro. Useimmissa von Willebrandin taudin tapauksissa havaitaan heikentynyt ristosetiiniaggregaatio, kun vaste ADP:lle, kollageenille ja adrenaliinille on normaali. Heikentynyttä ristosetiiniaggregaatiota havaitaan myös Bernard-Soulierin makrosyyttisessä trombodystrofiassa (ristosetiiniaggregaatioreseptorien puuttuminen verihiutaleiden kalvolta). Erotteluun käytetään testiä, jossa lisätään normaalia plasmaa: von Willebrandin taudissa ristosetiiniaggregaatio normalisoituu normaalin plasman lisäämisen jälkeen, kun taas näin ei tapahdu Bernard-Soulierin oireyhtymässä.

Tutkimusta voidaan käyttää myös hemofilia A:n (tekijä VIII:n puutos) ja von Willebrandin taudin erotusdiagnoosissa. Hemofiliassa VIII-k:n pitoisuus on jyrkästi alentunut ja VIII-fB:n pitoisuus on normaalirajoissa. Kliinisesti tämä ero ilmenee siten, että hemofiliassa esiintyy hematoomatyyppistä lisääntynyttä verenvuotoa ja von Willebrandin taudissa petekkiaalihematoomatyyppistä.

Ristosetiinin aiheuttama verihiutaleiden agglutinaatio on vähentynyt useimmissa von Willebrandin taudin tapauksissa tyyppiä IIB lukuun ottamatta.

Von Willebrand -tekijän ja tekijä VIII:n (VIII-vWF) antigeeninen rakenne havaitaan erilaisilla immunologisilla menetelmillä, ja von Willebrand -tekijän molekyylikoon mukaan jakautuminen määritetään agaroosigeelielektroforeesilla. Näitä testejä käytetään von Willebrand -taudin tyypin määrittämiseen.

Verihiutaleiden aggregaation tutkimusta erilaisilla indusoijilla ei suoriteta ainoastaan verihiutaleiden aggregaatiotoimintojen häiriöiden tunnistamiseksi. Tämän tutkimuksen avulla voidaan arvioida verihiutaleiden vastaisen hoidon tehokkuutta, valita yksittäiset lääkeannokset ja suorittaa lääkeaineen seurantaa.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]